Антитела при гепатите с

Современные препараты прямого противовирусного действия помогают достичь полного излечения при гепатите С в 95–99 % случаев. После излечения пациенты остаются под наблюдением и периодически сдают анализы. Стоит ли пугаться того, что в результатах снова и снова фигурируют антитела к вирусу? Как правильно интерпретировать этот факт?

Что такое антитела

Вирус гепатита С имеет в своем составе комплекс белковых компонентов. В ответ на их проникновение в организм активизируется иммунная система. Стремясь побороть антиген (чужеродное тело), она вырабатывает антитела – иммуноглобулины.

В организме человека есть 5 классов антител, которые отличаются по свойствам, составу и массе:

• IgM – вырабатывается первым в ответ на инфекцию. Отличается высокой активностью, составляет всего 10 % от общего количества антител.
• IgG – вырабатывается примерно через пять суток после инфицирования и обеспечивает основной иммунный ответ. Его доля среди всех – 70–75 %. Имеет очень малые размеры, поэтому проходит через плаценту и передается от матери новорожденному.
• IgA – локализуется в местах проникновения болезнетворных микроорганизмов (на слизистых дыхательных путей, в желудке, кишечнике, мочеполовой системе). Эти иммуноглобулины препятствуют прикреплению чужеродных агентов к слизистым, связываясь с ними в единое целое. Их доля в организме – 15–20 %.
• IgE и IgD – не имеют диагностической ценности, содержатся в сыворотке крови.

Какие антитела ищут при диагностике гепатита С

При подозрении на гепатит С внимание приковано к антителам IgG и IgМ, а также их комбинации, которые определяет иммуноферментный анализ (ИФА):

• если в крови есть IgG, это может указывать на вялотекущий инфекционный процесс или контакт организма с вирусом в прошлом (необходима диагностика на РНК вируса по методу ПЦР);
• наличие IgМ сигнализирует об острой стадии, а если количественный показатель в динамике увеличивается, можно заподозрить переход заболевания в хроническую стадию;
• чаще всего прибегают к суммарному показателю антител anti-HCV total (IgG и IgМ), информативному спустя 1,5–3 месяца после заражения.

Выделяют также антитела к неструктурным белкам возбудителя гепатита С – NS3, NS4, NS5. Каждый из них появляется на определенной стадии (снижение может указывать на начало ремиссии):

• NS3 – в начале болезни (индикатор инфицирования), при хронизации его количество остается в крови стабильно высоким;
• NS4 – на поздней стадии, сигнализирует о значительном поражении печени;
• NS5 – также на поздней стадии, указывает на глубокий хронический процесс.

Антитела появляются в крови в разные периоды болезни. Обнаружить суммарные иммуноглобулины можно только на втором месяце инфицирования. В течение первых шести недель, в активной острой фазе, нарастает уровень IgM. Появление антител класса G говорит о том, что болезнь перешла в хроническую стадию – от момента заражения прошло не менее трех месяцев.

Вариативность интерпретации результатов

В зависимости от наличия в крови тех или иных антител гепатологи определяют не только факт присутствия вируса, но и стадию инфекционно-воспалительного процесса. Гепатит С проходит две фазы развития:

• латентная – клинические проявления отсутствуют, но ввиду вирусоносительства в крови есть небольшое количество антител класса IgG;
• острая – количество иммуноглобулинов увеличивается, что указывает на размножение возбудителя и разрушение гепатоцитов, клеток печени.

Диагностировать наличие вируса позволяют дополнительные обследования – биохимия крови (рост печеночных ферментов АЛТ, АСТ), а также позитивный результат анализа на РНК вируса по методу ПЦР. Сам факт присутствия в крови антител еще не указывает на то, что человек инфицирован: возможно, он принадлежит к тем 20–30 %, которым удалось самостоятельно побороть вирус.

Диагностика стадии гепатита С с применением суммарного показателя anti-HCV total

Почему после лечения антитела остаются

Сегодня для лечения гепатита С применяют эффективные препараты прямого противовирусного действия, например индийские дженерики «Софосбувир» и «Даклатасвир». Лекарства воздействуют непосредственно на вирус и разъединяют белковые цепи, вследствие чего прекращается их редупликация. Постепенно снижается вирусная нагрузка – наступает ремиссия.

В результате лечения в организме не остается частиц вируса гепатита С, в отличие от антител, на которые лекарства не действуют. После излечения иммуноглобулины класса G могут циркулировать в организме в течение нескольких лет, при этом их количество постепенно снижается. Главное условие – отрицательный результат анализа ПЦР и отсутствие антител класса М, которые продуцируются в острую фазу. Также достаточно долго после выздоровления сохраняются иммуноглобулины хронической фазы NS4 и NS5.

Тем не менее к интерпретации факта наличия антител в крови нужно подходить избирательно. Если после лечения гепатита С даже спустя несколько лет в крови обнаруживают суммарные иммуноглобулины, это стоит расценивать как тревожный признак. Антитела IgM (индикатор острой фазы) в норме должны отсутствовать, в то время как присутствие IgG допускается.

К сожалению, в течение первого года после успешной терапии бывают и рецидивы. К ним склонны пациенты с генотипом 1, продвинутой степенью фиброза или цирроза, женщины в период климакса и люди с лишним весом. Подтвердить полную победу над болезнью позволяет только отрицательный результат на РНК вируса (ПЦР) в течение года. Делать выводы на основе анализа антител нецелесообразно.

Не стоит паниковать, если после лечения гепатита С в Индии в крови снова обнаружили антитела. Важно знать, что это за антитела и могут ли они в норме присутствовать после выздоровления; снижается ли их количество со временем; что говорят результаты ПЦР в течение года. Если анализ на РНК в течение 12 месяцев подтверждает, что вируса в организме нет, все в порядке. Теперь достаточно периодически контролировать ситуацию и довериться хорошему гепатологу!

Поражение печени вирусом типа С – одна из острых проблем инфекционистов и гепатологов. Для заболевания характерный длительный инкубационный срок, в течение которого отсутствуют клинические симптомы. В это время носитель HCV является наиболее опасным, так как не знает о своей болезни и способен заразить здоровых людей.

Впервые о вирусе заговорили в конце 20-го столетия, после чего начались его полномасштабные исследования. На сегодня известно о шести его формах и большом количестве подтипов. Такая вариабельность структуры обусловлена способностью возбудителя мутировать.

В основе развития инфекционно-воспалительного процесса в печени лежит деструкция гепатоцитов (ее клеток). Они разрушаются под непосредственным влиянием вируса, обладающего цитотоксическим действием. Единственным шансом выявить патогенного агента на доклинической стадии является лабораторная диагностика, которая подразумевает поиск антител и генетического набора вируса.

Что такое антитела гепатита С в крови?

Человеку, далекому от медицины, сложно понять результаты лабораторных исследований, не имея представления об антителах. Дело в том, что структура возбудителя состоит их комплекса белковых компонентов. Они после проникновения в организм вызывают реакцию иммунной системы, как бы раздражая ее своим присутствием. Таким образом начинается продукция антител к антигенам гепатита С.

Они могут быть нескольких видов. Благодаря оценке их качественного состава врачу удается заподозрить инфицирование человека, а также установить стадию заболевания (в том числе и выздоровление).

Первичным методом выявления антител к гепатиту С является иммуноферментное исследование. Его цель заключается в поиске специфических Ig, которые синтезируются в ответ на проникновение инфекции в организм. Заметим, что ИФА позволяет заподозрить болезнь, после чего требуется дальнейшее проведение полимеразной цепной реакции.

Антитела даже после полной победы над вирусом остаются на всю жизнь в крови человека и свидетельствуют о прошлом контакте иммунитета с возбудителем.

Фазы болезни

Антитела к гепатиту С могут указывать на стадию инфекционно-воспалительного процесса, что помогает специалисту подобрать эффективные противовирусные лекарства и отследить динамику изменений. Выделяют две фазы заболевания:

• латентная. У человека отсутствуют какие-либо клинические симптомы, несмотря на то, что он уже является вирусоносителем. В то же время анализ на антитела (IgG) к гепатиту С будет положительный. Уровень РНК и IgG – небольшой.
• острая – характеризуется нарастанием титра антител, в частности IgG и IgМ, что указывает на интенсивное размножение возбудителей и выраженную деструкцию гепатоцитов. Их разрушение подтверждается ростом печеночных ферментов (АЛТ, АСТ), что выявляется биохимией. Кроме того, обнаруживается РНК патогенного агента в высокой концентрации.

Положительная динамика на фоне лечения подтверждается снижением вирусной нагрузки. При выздоровлении РНК возбудителя не обнаруживается, остаются лишь иммуноглобулины G, которые указывают на перенесенное заболевание.

Показания для ИФА

В большинстве случаев иммунитет не может самостоятельно справиться с возбудителем, так как ему не удается сформировать мощный ответ против него. Это обусловлено изменением структуры вируса, вследствие чего вырабатываемые антитела оказываются неэффективными.

Обычно ИФА назначается несколько раз, так как возможет отрицательный результат (вначале болезни) или ложноположительный (у беременных, при аутоиммунных патологиях или проведении анти-ВИЧ терапии).

Чтобы подтвердить или опровергнуть ответ ИФА, необходимо его повторно провести через месяц, а также сдать кровь для ПЦР и биохимии.

Антитела к вирусу гепатита С исследуются:

1. у инъекционных наркоманов;
2. у людей с циррозом печени;
3. если беременная является вирусоносителем. В данном случае обследованию подлежит как мать, так и младенец. Риск его инфицирования колеблется от 5% до 25% в зависимости от вирусной нагрузки и активность заболевания;
4. после состоявшегося незащищенного секса. Вероятность передачи вируса не превышает 5%, однако при травмировании слизистой гениталий, у гомосексуалистов, а также любителей частой смены партнеров риск значительно выше;
5. после нанесения татуровки и выполнении пирсинга;
6. после посещения косметологического салона с плохой репутацией, так как инфицирование может произойти через загрязненные инструменты;
7. перед сдачей крови, если человек желает стать донором;
8. у медсотрудникаов;
9. у работников интернатов;
10. у недавно освободившихся из МЛС;
11. если обнаружено повышение печеночных ферментов (АЛТ, АСТ) — с целью исключения вирусного поражения органа;
12. при тесном контакте с вирусоносителем;
13. у людей с гепатоспленомегалией (увеличением объема печени и селезенки);
14. у ВИЧ-инфицированных;
15. у человека с желтушностью кожи, гиперпигментацией ладоней, хронической усталостью и болью в печени;
16. перед плановым хирургическим вмешательством;
17. при планировании беременности;
18. у людей со структурными изменениями в печени, выявленными при УЗИ.

Иммуноферментный анализ используется в качестве скрининга для массового обследования людей и поиска вирусоносителей. Это позволяет предупредить вспышку инфекционного заболевания. Лечение, начатое на начальной стадии гепатита, значительно эффективнее терапии на фоне цирроза печени.

Виды антител

Чтобы правильно трактовать результаты лабораторной диагностики, нужно знать, какими бывают антитела, и что они могут означать:

1. анти-HCV IgG – основной вид антигенов, представленных иммуноглобулинами G. Их можно обнаружить при первичном обследовании человека, благодаря чему удается заподозрить болезнь. При положительном ответе стоит задуматься о вялотекущем инфекционном процессе или произошедшем контакте иммунитета с вирусов в прошлом. Пациенту необходимо дальнейшее проведение диагностики с помощью ПЦР;
2. анти-HCVcoreIgM. Этот тип маркера означает «антитела к ядерным структурам» патогенного агента. Они появляются в ближайшее время после заражения и указывают на острое заболевание. Нарастание титра отмечается при снижении силы иммунной защиты и активации вирусов при хроническом течении болезни. При ремиссии маркер слабоположительный;
3. анти-HCV total – суммарный показатель антител к структурным белковым соединениям возбудителя. Зачастую именно он позволяет точно диагностировать стадию патологии. Лабораторное исследование становится информативным спустя 1-1,5 месяца от момента проникновения HCV в организм. Суммарные антитела к вирусу гепатита С представляют собой анализ иммуноглобулином М и G. Их рост наблюдается в среднем через 8 недель после инфицирования. Они сохраняются на всю жизнь и свидетельствуют о перенесенной болезни или ее хроническом течении;
4. анти-HCVNS. Показатель представляет собой антитела к неструктурным белкам возбудителя. К ним относится NS3, NS4 и NS5. Первый вид обнаруживается вначале болезни и указывает на контакт иммунитета с HCV. Он является индикатором инфицирования. Длительное сохранение его высокого уровня – косвенный признак хронизации вирусно-воспалительного процесса в печени. Антитела к оставшимся двум видам белковых структур выявляются на поздней стадии гепатита. NS4 – показатель степени поражения органа, а NS5 – свидетельствует о хроническом течении заболевания. Снижение их титров можно расценивать как начало ремиссии. Учитывая высокую стоимость лабораторного исследования, оно достаточно редко применяется на практике.

Существует также еще один маркер – это HCV-RNA, который подразумевает поиск генетического набора возбудителя в крови. В зависимости от вирусной нагрузки носитель инфекции может быть более или менее заразный. Для исследования используются тест-системы с высокой чувствительностью, что дает возможность обнаружить патогенного агента на доклинической стадии. Кроме того, при помощи ПЦР можно выявить инфекцию на этапе, когда антитела еще отсутствуют.

Время появления антител в крови

Важно понимать, что антитела появляются в разное время, что позволяет более точно установить стадию инфекционно-воспалительного процесса, оценить риск возникновения осложнений, а также заподозрить гепатит вначале развития.

Суммарные иммуноглобулины начинают регистрироваться в крови на втором месяце инфицирования. В первые 6 недель стремительно нарастает уровень IgM. Это свидетельствует об остром течении заболевания и высокой активности вируса. После наступления пика их концентрации наблюдается ее уменьшение, что указывает на начало следующей фазы болезни.

Если обнаружены антитела класса G к гепатиту С, стоит заподозрить окончание острой стадии и переход патологии в хроническую. Они выявляются спустя три месяца от момента попадания инфекции в организм.

Иногда суммарные антитела удается выделить уже на втором месяце болезни.

Что касается анти-NS3, то они обнаруживаются на раннем этапе сероконверсии, а анти-NS4 и -NS5 – на более поздней стадии.

Расшифровка исследований

Для выявления иммуноглобулинов используется метод ИФА. Он основан на реакции антиген-антитело, которая протекает под действием специальных ферментов.

В норме суммарный показатель не регистрируется в крови. Для количественной оценки антител применяется коэффициент позитивности «R». Он обозначает плотность исследуемого маркера в биологическом материале. Его референсные значения составляют от нуля до 0,8. Диапазон 0,8-1 свидетельствует о сомнительном ответе диагностики и требует дальнейшего обследования пациента. Положительный результат считается при превышении R единицы.

Если проведена ИФА и ПЦР, интерпретация результатов диагностики может быть следующая:

Если пациенту проведено развернутое исследование, тогда результаты могут быть такими:

Только специалист может правильно трактовать результаты лабораторных анализов. Постановка диагноза основывается на комплексной оценке клинической симптоматики, данных инструментальных обследований, ИФА и ПЦР.

При получении ложно+/- результатов требуется повторная сдача крови. Обязательно анализ проводится в конце лечения, что нужно для подтверждения выздоровления.

Неотъемлемой частью диагностики является УЗИ, которое позволяет оценить размеры, структуру и очертания печени и других внутренних органов.

Для более тщательного анализа требуется биопсия. Она проводится под анестезией, после чего материал направляется на гистологическое исследование.

Путем регулярной проверки крови пациента специалисту удается отследить динамику изменений, судить о степени повреждения печени, активности возбудителя и эффективности проводимой терапии.

В ответ на внедрение чужеродного агента иммунная система человека вырабатывает иммуноглобулины (Ig). Эти специфические вещества предназначены для связывания с чужеродным агентом и его обезвреживания. Определение противовирусных антител имеет большое значение для диагностики при хроническом вирусном гепатите С (ХВГС).

Как выявить антитела?

Антитела к вирусу в крови человека выявляет метод ИФА (иммуноферментный анализ). Эта методика основана на реакции между антигеном (вирусом) и иммуноглобулинами (antiHVC). Суть метода состоит в том, что в специальные планшеты вносят чистые вирусные антигены, антитела к которому ищут в крови. Затем в каждую лунку добавляют кровь больного. Если в ней есть антитела к вирусу гепатита С определенного генотипа, в лунках происходит образование иммунных комплексов «антиген-антитело».

Спустя некоторое количество времени в лунки добавляют специальное красящее вещество, которое вступает в цветную ферментную реакцию с иммунным комплексом. По плотности окраски проводят количественное определение титра антител. Метод имеет высокую чувствительность – до 90%.

К преимуществам метода ИФА можно отнести:

• высокую чувствительность;
• простоту и быстроту проведения анализа;
• возможность проведения исследования при малом количестве биологического материала;
• невысокую себестоимость;
• возможность ранней диагностики;
• пригодность для скрининга большого количества людей;
• возможность отслеживать показатели в динамике.

Единственным недостатком ИФА является то, что он определяет не сам возбудитель, а лишь реакцию иммунной системы на него. Поэтому при всех преимуществах метода для постановки диагноза ХВГС его недостаточно: требуется проведение дополнительных анализов, выявляющих генетический материал возбудителя.

Суммарные антитела к гепатиту С

Современная диагностика с помощью метода ИФА позволяет обнаружить в крови пациента как отдельные фракции антител (IgM и IgG), так и их общее количество — antiHVC total. Эти иммуноглобулины с диагностической точки зрения являются маркерами ХВГС. Что означает их обнаружение? Иммуноглобулины класса М определяются при остром процессе. Они могут выявляться уже спустя 4-6 недель после заражения. G-иммуноглобулины являются признаком хронизации процесса. Их можно обнаружить в крови спустя 11-12 недель после инфицирования, а после лечения они могут сохраняться до 8 и более лет. При этом их титр постепенно снижается.

Бывают случаи, когда у здорового человека при проведении ИФА на antiHVC total обнаруживают противовирусные антитела. Это может быть как признаком хронической патологии, так и следствием самопроизвольного излечения пациента. Такие сомнения не позволяют врачу установить диагноз ХВГС, руководствуясь только ИФА.

Различают антитела к структурным (ядерным, core) и неструктурным (nonstructural, NS) белкам вируса. Целью их количественного определения является установление:

• активности вируса;
• вирусной нагрузки;
• вероятности хронизации процесса;
• степени повреждения печени.

AntiHVC core IgG – это антитела, которые появляются при хронизации процесса, поэтому для определения острой фазы ХВГС не используются. Своей максимальной концентрации эти иммуноглобулины достигают к пятому-шестому месяцу болезни, а у длительно болеющих и не получающих лечения пациентов они определяются в течение всей жизни.

AntiHVC IgМ являются антителами острого периода и говорят об уровне виремии. Их концентрация нарастает в течение первых 4-6 недель болезни, а после перехода процесса в хронический – уменьшается вплоть до исчезновения. Повторно в крови больного иммуноглобулины класса М могут появляться при обострении заболевания.

Антитела к неструктурным белкам (AntiHVC NS) выявляются в разные сроки болезни. Диагностически значимыми из них являются NS3, NS4 и NS5. AntiHVC NS3 – самые ранние антитела к вирусу ХВГС. Они являются маркерами острого периода болезни. По титру (количеству) этих антител определяют вирусную нагрузку на организм пациента.

AntiHVC NS4 и NS5 – антитела хронической фазы. Считается, что их появление связано с поражением ткани печени. Высокий титр AntiHVC NS5 указывает на наличие в крови вирусной РНК, а его постепенное снижение – на начало фазы ремиссии. Эти антитела длительное время после выздоровления присутствуют в организме.

Расшифровка анализа на антитела к гепатиту С

В зависимости от клинической симптоматики и результатов анализа на РНК вируса гепатита С данные, полученные после ИФА, могут трактоваться по-разному:

• положительные результаты на AntiHVC IgМ, AntiHVC IgG и вирусную РНК говорят об остром процессе или об обострении хронического;
• если в крови обнаружены только антитела класса G без генов вируса, это указывает на перенесенное, но излеченное заболевание. При этом РНК вируса в крови нет;
• отсутствие в крови и AntiHVC и РНК вируса считается нормой, или отрицательным анализом на антитела.

Если выявлены специфические антитела, а самого вируса в крови нет, это не означает, что человек болен, но и не отрицает этого. Такой анализ считается сомнительным и требует повторного исследования через 2-3 недели. Таким образом, если в крови найдены иммуноглобулины к вирусу ХВГС, необходима комплексная диагностика: клинические, инструментальные, серологические и биохимические исследования.

Для постановки диагноза важен не только положительный ИФА, что означает наличие вируса в крови в настоящее время или ранее, но и обнаружение вирусного генетического материала.

ПЦР: обнаружение антигенов гепатита С

Вирусный антиген, а точнее его РНК, определяют методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Этот метод, наряду с ИФА, является одним из ключевых лабораторных анализов, позволяющих врачу поставить диагноз ХВГС. Назначается он тогда, когда получен положительный результат анализа на антитела.

Анализ на антитела является более дешевым, чем ПЦР, поэтому именно он используется для скрининга некоторых категорий населения (беременных, доноров, медиков, детей из группы риска). Вместе с исследованием на гепатит С чаще всего проводят и определение австралийского антигена (гепатит В).

Носитель антител к вирусу гепатита С

Если методом ИФА в крови пациента обнаружены AntiHVC к вирусу, но никаких клинических признаков гепатита С при этом нет, это может быть трактовано, как носительство возбудителя. Вирусоноситель может сам не болеть, но при этом активно заражать контактирующих с ним людей, например, через кровь носителя. В таком случае нужна дифференциальная диагностика: расширенный анализ антител и проведение ПЦР. Если анализ ПЦР окажется отрицательным, человек, возможно, перенес заболевание латентно, то есть бессимптомно, и самостоятельно излечился. При положительном ПЦР вероятность носительства очень высока. Как быть, если антитела к гепатиту С есть, а ПЦР отрицательный?

Важно правильно трактовать анализы не только для постановки диагноза ХВГС, но и для контроля эффективности его лечения:

• если на фоне проводимого лечения антитела к гепатиту С не пропадают, это указывает на его неэффективность;
• если после противовирусной терапии вновь выявлены AntiHVC IgМ, это означает, что процесс снова активировался.

В любом случае, если по результатам анализов РНК вирус не обнаружен, но антитела к нему обнаружены, следует провести повторное обследование, чтобы убедиться в точности результата.

После лечения гепатита С антитела остаются

Остаются ли антитела в крови после курса лечения и почему? После эффективной противовирусной терапии в норме могут выявляться только IgG. Время их циркуляции в организме переболевшего человека может составлять несколько лет. Главным признаком излеченного ХВГС является постепенное уменьшение титра IgG при отсутствии вирусной РНК и IgМ. Если пациент вылечил гепатит С уже давно, а суммарные антитела у него остались, нужно провести идентификацию антител: остаточные титры IgG – это норма, а вот IgМ – это неблагоприятный признак.

Не стоит также забывать, что бывают ложные результаты анализов на антитела: как положительные, так и отрицательные. Так, например, если в крови есть РНК вируса (качественной или количественной ПЦР), а антител к нему нет, это можно трактовать как ложноотрицательный или сомнительный анализ.

Причин появления ложных результатов несколько:

• аутоиммунные заболевания;
• доброкачественные и злокачественные опухоли в организме;
• тяжелые инфекционные процессы; после прививки (от гепатитов А и В, гриппа, столбняка);
• лечение интерфероном-альфа или иммунодепрессантами;
• значительное повышение печеночных показателей (АСТ, АЛТ);
• беременность;
• неправильная подготовка к сдаче анализа (прием алкоголя, употребление жирной пищи накануне).

При беременности процент ложных анализов достигает 10-15%, что связано со значительным изменением реактивности организма женщины и физиологическим угнетением ее иммунной системы. Нельзя игнорировать также человеческий фактор и нарушение условий проведения анализа. Анализы проводятся «инвитро», то есть вне живых организмов, поэтому лабораторные ошибки имеют место быть. К индивидуальным особенностям организма, которые могут влиять на результаты исследования, относятся гипер- или гипореактивность организма.

Анализ на антитела, несмотря на все свои преимущества, не является 100%-ным поводом для постановки диагноза. Риск ошибок есть всегда, поэтому, чтобы избежать возможных ошибок, нужно комплексное обследование пациента.